Descrição: Objetivo Implementar a técnica de maturação in vitro de folículos pre antrais de bovino no laboratório de pesquisa da Clinica Pro-Criar. Material e Metodos Serao utilizados ovários bovinos adquiridos em matadouro na cidade de Belo Horizonte, os quais serão transportados a 37oC ao laboratório. No laboratório, a medula sera removida e o córtex será cortado em pequenos fragmentos, dos quais serão isolados folículos pre-antrais secundários (125 a 225 um), que por sua vez serão encapsulados em uma matriz de alginato de sódio e cultivados individualmente por aproximadamente 40 dias a 37oC, 5% O2, 6% CO2 e 89% N2, em meio suplementado com FSH (rh) humano (NV Organon, Oss, Netherlands) média dosagem (3 ng/ml), nos 20 primeiros dias, e baixa dosagem (0.3 ng/ml), no restante do tempo de cultivo, e 0.3% (v/v) SPS (soro protéico substituto), 5 g/ml de insulina, 5 g/ml de transferrina, 5 ng/ml de sódio-selenito (Sigma-Aldrich) e 1 mg/ml de fetuina bovina purificada (Sigma-Aldrich). Os folículos que atingirem estágio antral serão tratados com gonadotrofina coriónica humana (hCG) (Merck Serono, Geneva, Switzerland) (100 ng/ml) por 34 h para iniciar a maturação meiótica do oócito. Após este período, os oócitos serão coletados com a finalidade de se determinar o grau de maturação e competência oocitária. O meio de cultivo será coletado semanalmente, armazenado a 80oC negativos e posteriormente analisados para hormônios esteróides ovarianos…